(2)提取时间
称取0.20g槐米粉末6份,面法与16mL50%的优化乙醇混和,在提取温度为90℃的槐米条件下,提取不同时间,中芦结果如图3所示。溶剂热法由图可知,工艺随着提取时间的面法延长提取率逐渐增加,提取时间超过30min后,优化芦丁的槐米提取率趋于平稳。这是中芦由于溶剂热法是在密闭的体系中进行的,在加热过程中溶剂产生的溶剂热法自生压力,可以加快溶剂的工艺渗透和溶质的扩散速率。因此,面法可以在短时间内,优化使细胞内外有效成分的槐米溶解扩散达到平衡,从而提高提取效率。因此,本实验中的提取时间以30min为宜。
(3)提取温度
称取0.2g干燥槐米粉末6份,与50%乙醇16mL混和,在不同的温度下提取30min。结果如图4所示。由图4可知,40~70℃之间,芦丁的提取率随温度的升高逐渐增加。提取温度的升高,一方面加快了溶剂分子的扩散速率和进出细胞的交换速率,提高了溶剂的溶解能力;另一方面温度的升高对提取体系内的自生压力产生了影响,温度越高,自生压力越大。植物细胞的细胞壁对细胞有着保护作用,细胞壁的破裂有助于内容物的溶出,从而提高目标物的提取率。同时,压力的升高有利于细胞壁的破裂,提高提取效率。提取温度为70℃时,芦丁的提取率最高。超过此温度后,芦丁提取率开始降低。这可能是由于温度的升高一方面促使蛋白质等生物大分子变性、凝固,阻碍了芦丁从组织细胞内向周围提取溶剂的扩散;另一方面体系内自生压力的升高,致使芦丁在较高的温度和压力下,不能稳定存在,发生分解,导致芦丁的提取率降低。
按照不同的液料比称取槐米粉末6份,与16mL50%的乙醇溶液混合,70℃提取30min,结果如图5所示。从图中可以看出,适宜的液料比有效的增加了液料间的芦丁浓度差,有利于物料与乙醇溶剂的充分接触,提升芦丁的提取率。但当液料比超过100∶1时,继续增大液料比,芦丁的提取率无显著变化。因此选择100∶1mL/g为最适合液料比。
3、响应面试验设计及结果分析
(1)CentralComposite设计实验方案及试验结果
采用DesignExpert8.0.6软件设计试验条件,选用CentralComposite模型,对表2的结果进行多元线性回归拟合,得到乙醇体积分数(A)、提取时间(B)、提取温度(C)以及液料比(D)为自变量的四元二次方程:
Y=18.08+2.41A+0.97B+1.14C+0.84D+0.27AB-1.06AC-0.91AD+0.40BC-1.11BD+0.52CD-2.25A2-1.64B2-2.05C2-0.83D2。
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